目的：建立高效液相色谱分离检测脑蛋白水解物注射液各种氨基酸的测定方法。方法：氨基酸含量测定采用异硫氰酸苯酯柱前衍生化；色谱柱为C18柱（VP-DOS；150 mm×46 mm）；流动相：A为0.1 mol/L醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH 6.5）-乙腈（93∶7），B为水-乙腈（1∶4）；检测波长：254 nm；流速：1 mL/min；柱温：40℃。结果：16种氨基酸在32 min内完全分离，各种氨基酸之间没有出现干扰现象，且多次重复测定结果误差很小。结论：建立的高效液相色谱法准确性高、重现性好，可以有效地控制脑蛋白水解物注射液的质量。