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find Keyword "copper chaperone for SOD1" 1 results
  • Application of siRNA Technology to Silence Copper Chaperone for SOD1 Gene in Human Umbilical Vein Endothelial Cells

    目的 采用RNA干扰技术沉默CCS(copper chaperone for SOD1)基因,构建相关小干扰RNA(siRNA),探索出针对CCS的高效siRNA序列。 方法 合成用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞中沉默CCS基因的siRNA。应用脂质体转染的方法在HUVEC细胞中对CCS基因进行RNA沉默。蛋白免疫印迹Western blotting检测沉默前后CCS蛋白表达变化的情况,甲基四唑蓝法MTT检测转染前后细胞活力。最后用单因素方差分析对数据进行统计学分析,以确定有效的siRNA序列。 结果 转染前后细胞形态无肉眼可见变化,转染后细胞活力分别为98.5%和98.8%。CCS蛋白沉默率分别为63.7%和61.4%。 结论 采用siCCS-2和siCCS-3序列转染条件对HUVEC细胞活力损伤小,CCS沉默效率高,实验条件稳定,重复性好。为我们继续研究沉默CCS后抑制血管内皮细胞的生长增殖、血管形成提供了稳定的实验基础。

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